產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本試劑盒采用ChainFree® Anti-HA 磁珠來(lái)完成HA標簽（YPYDVPDYA）融合蛋白的RNA免疫共沉淀（RIP）實(shí)驗。ChainFree® Anti-HA磁珠偶聯(lián)的是經(jīng)過(guò)嚴格篩選、優(yōu)化并重組表達的無(wú)輕、重鏈的HA抗體，所以IP洗脫液中不會(huì )有抗體輕、重鏈污染。

實(shí)驗前先將HA標簽與目標蛋白在細胞或組織中融合表達。裂解樣本后，將ChainFree® Anti-HA磁珠加入樣本中，磁珠上偶聯(lián)的HA抗體與HA標簽融合蛋白及其結合蛋白形成復合體，去除未結合的物質(zhì)后，洗脫并分離蛋白與RNA，再利用qPCR（RIP-qPCR）或高通量測序（RIP-Seq）方法來(lái)鑒定或篩選與目標蛋白結合的RNA。

試劑盒成分

＊注意：該試劑盒包含足夠完成12、24或40個(gè)反應的試劑，每個(gè)反應使用40μL磁珠。由于每次pull-down實(shí)驗至少需要設置一個(gè)實(shí)驗組和一個(gè)陰性對照組，因此一次實(shí)驗至少需要使用2個(gè)反應的試劑量。

額外所需材料

1. 自備試劑：HA抗體、PBS、RNase-free 水、Trizol、 氯仿、異丙醇、75%乙醇。

2.所需儀器：磁力架、混勻儀、低溫離心機、超聲波破碎儀。

使用說(shuō)明

I 注意事項

1. 請勿干燥、冷凍或劇烈渦旋磁珠，禁止長(cháng)時(shí)間置于磁場(chǎng)，這些操作可能會(huì )引起磁珠聚團，降低結合活性。

2. 為保證磁珠均勻分布，請在使用前通過(guò)反復顛倒、輕微渦旋徹底混勻磁珠。

3. 請務(wù)必使用無(wú) RNase 的實(shí)驗材料：如離心管、槍頭等。

4. 實(shí)驗的具體樣品量和孵育時(shí)間依賴(lài)于每個(gè)特定體系，可能需要優(yōu)化才能得到最大產(chǎn)量。

5. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

說(shuō)明書(shū)：F1505 HA-Tag RIP試劑盒（動(dòng)物）.pdf (219.83 K)